高效液相色谱法测定龙葵中的澳洲茄胺

2.2色谱条件的确定澳洲茄胺分子缺少共轭双键结构，紫外吸收较弱，对其进行紫外检测时只能要么进行衍生，要么选择其末端吸收。当采用末端吸收波长进行检测时，色谱流动相最好采用截止波长低的乙腈。但是，龙葵生物碱的色谱保留不强，如果采用洗脱强度大的流动相，势必影响分离。同样，由于采用末端吸收进行检测，也不利于梯度洗脱，否则基线漂移严重。在大量实验的基础上，我们优选了“1.2”项所述的色谱检测条件。如图2所示，在该条件下，澳洲茄胺在真实样品中获得了良好的基线分离。

　　2.3方法学验证2.3.1标准曲线精密吸取澳洲茄胺储备溶液0.5，0.8，1.0，2.0，2.5ml和3.0ml各置于5ml的容量瓶配成标准系列，按上述色谱条件进样分析，在102～612μg/ml范围内，对样品浓度（X）与峰面积（Y）进行回归分析，得回归方程Y=689.52X 3.65，r=0.9999。

　　2.3.2精密度实验取上述供试品溶液20μl，在上述色谱条件连续进样6次测定，澳洲茄胺峰面积的RSD为1.45%，符合含量测定要求。

　　2.3.3回收率实验精密称取龙葵药材6份，分为3组，依次按本底含量的50%，100%和150%加入澳洲茄胺对照品，按照供试品制备与测定方法，计算回收率。澳洲茄胺的平均回收率为96.0%，RSD=3.35%（n=6）。

　　2.4样品测定按照“1.3”项条件制备龙葵样品溶液，依“1.2”项条件进样分析，图2-b是龙葵全草的典型色谱图。按照外标法所得龙葵全草和成熟果实中的澳洲茄胺含量如表1。结果显示，澳洲茄胺在龙葵果实中的含量明显高于其在全草中的含量。

　　3结论澳洲茄碱与澳洲茄边碱是龙葵药材中的主要抗肿瘤活性成分。它们主要以澳洲茄胺为苷元的生物碱苷的形式存在于龙葵中，其含量在龙葵果实中最高，全草次之。由于澳洲茄碱和澳洲茄边碱与澳洲茄胺存在着一一对应的化学计量比关系，因此，以澳洲茄胺作为龙葵生物碱含量的评判指标是可行而且可靠的。本文所开发的方法简单快速，准确可靠，可作为龙葵药材及其制剂的质量控制方法。