色谱实验心得记录

　　液相色谱柱上的扩散效应，与气相填充柱有些类似，却又不尽相同。

　　相似之处在于液相色谱柱也是非中空结构，一根空柱子填满了填料，扩散效应的种类也是由填料颗粒造成的。

　　不同之处在于两点，第一点是液相色谱柱的填料粒度可以做到很小，远比气相色谱的填料小，这样填料颗粒带来的扩散效应可以降得更低，第二点是流动相为液体而不是气体，气体对待测组份相互间办的作用可以忽略，而液体则不能忽视，组份在液体中的溶解作用则是影响保留强度的主要因素，远强于柱内管壁对其的影响。这两点使得液相色谱柱的直径虽然与气相填充柱相近，但是其扩散效应却小得多，由于小得多，因此可以把柱子做得很短，柱子短了，由柱子变长带来的扩散效应又可以进一步减少。所以，同样大致直径的液相柱，柱效可以比气相填充柱高很多。

　　前面说到，由于装填的要求，填充柱不能做得很细，而且由于是气相色谱柱，填料颗粒是受限制的，不能做得太小，一定要保持颗粒间的一定空隙，否则压力根本无法达到工作要求，这正是由气相色谱的基本特性造成。

　　前面一直在讲扩散效应，的确受它影响的内容太多了。例如，我们进样后会发现，开始出来的色谱峰会比较尖锐，色谱峰出得时间越晚峰形越扩散，或者说看起来更矮更胖更难看。这也是扩散效应的一个体现，在柱内的时间越长，物质扩散的时间也越长。

　　当柱子长到一定程度，或者物质在柱内呆的时间长到一定程度，最后的色谱峰会如何？由于存在扩散效应，它会不断地变矮变宽，然后呢，最后呢，最后就看不到了，它消失在基线之中，不被检测器识别，就相当于没有结果。这种现象是有很积极的作用的，因为你一针进去，总有些组分比较难出来，如果前几针的组分到了进后几针的时候才会产生一个色谱峰，就会存在很大的干扰，而且这种干扰是很不确定的。

　　我一直把扩散效应当作色谱理论知识中最重要的内容，没有之一；其地位远超塔板理论。可以这样说，我个人还是不太习惯用塔板理论去解释色谱行为，因为，所谓塔板数的高低，也就是由保留值与扩散效应决定的。保留值决定了保留时间，扩散效应决定了峰宽或半峰宽，前者除后者就是柱效的评价数据，也就是所谓的塔板数。

　　扩散效应要小，柱内径是一个很关键的因素，想得到好的的柱效，色谱柱的发展趋势就是越来越细，气相液相皆如此，不过最细的还是毛细柱。

　　在使用了一段时间毛细柱后，逐渐有了个想法，填充柱可以自己填，那毛细柱为什么不可以呢？还有液相柱为什么不可以呢？

　　先研究了一下装液相柱，其实液相色谱柱看起来很简单，一根内部抛光的不锈钢空管，两头螺帽，内部装满填料，就行了。而且手头用坏的液相柱好多根，如果是给自己用边空柱都不用买，直接拆旧柱就行了，液相柱的填料也买得到。可惜，丰满的理想很快被骨感的现实打得粉碎，试着拆了一根报废的液相柱，打开才发现，里面的填料填得如此紧密，以至于已经看不到填料的存在，只看到一整条半透明的晶莹光洁的玉石状物质，只有挖班民等干燥后才化为一堆白色粉末。这就是工业品的成就，完全不是自己手工能达到的效果。后来再查资料，装液相柱要专用的装柱机，装柱机有便宜有贵，但是如果专门去买装柱机就不是当时想象的小打小闹了，于是想想就算了吧。

　　毛细管柱的制作资料不多，但是还是能找得到。看过后最大的收获就是，它原来是把溶解了固定液的溶液以“灌”的形式从中间流过，让固定液在柱内壁保留以达到涂片的效果，由于液体的良好流动性，所以毛细柱的细与长，并不是装柱的困难瓶径。

　　第一个需要解决的是寻找可适用的空柱，所谓空柱，其实就是光导纤维，很幸运的，当年经常在色谱或分析类杂志上看到国内一家光导纤维厂：河北永年。规格很多，也可以零买个几米十几米。看到规格里刚好有0.530mm内径的，于是就定下这种规格。

　　我们都知道，毛细管柱内径最粗的就是0.530mm，为什么是这个数据呢？据说这是能满足柱上直接进样的最小内径，我试着拿一根手动进样针，还真得可以直接插进柱子里面。所以这个0.530mm，是由进样针的材料与工艺决定的，真是很有意思。

　　按广告上河北永年的电话打过去，联系好购买事项，等了好几个星期才到货，能到货就已经万幸了，如果没有它，我还真不知道去哪里买空柱，而且就算找个光导纤维厂，我怀疑最小的订货长度都是公里。而且就算是某个经销商买了几公里零卖，那售价也不知要翻多少翻。

我到现在也没搞明白，为什么河北永年会在色谱或化学类杂志上打广告，它的产品介绍倒也说得很清楚：光导纤维或空气相毛细色谱柱。国内真正认得出来