非成像式流式细胞仪的发展与应用

　　流式细胞仪在临床医学中最早应用于肿瘤学，主要是通过 DNA 含量和线粒体数量检测进行癌前病变和早期癌症的诊断以及化疗指导和愈后评估等。流式细胞仪能够精确检测细胞内 DNA 含量，可对癌症的性质和发展趋势进行判断，利于早期诊断。实际应用中需要将实体瘤组织解聚、分散制成单细胞悬液，并用荧光染料（碘化吡啶PI）染色，对细胞内的 DNA 含量进行检测。同时需要将不易区分的群体细胞分成 G1 期、S 期和 G2 期 3 个细胞亚群，DNA 的含量直接代表细胞的倍体状态，肿瘤的恶性程度和非倍体细胞有密切关系。流式细胞仪还可对恶性肿瘤 DNA 倍体异质体进行检测，对患者临床分期、病理分级、肿瘤转移具有重要意义。肿瘤早期诊断的一个重要依据就是 DNA 非整倍体细胞峰的存在。同时，细胞的 DNA 倍体分析也能够用于病人愈后情况的早期判断。异倍体肿瘤恶变的复发率和死亡率都比较高，然而，二倍体和近二倍体肿瘤的愈后状况明显比较好。流式细胞仪除能对癌症 DNA 含量进行分析外，还能够根据癌症 DNA 的分布直方图变化情况对化疗效果进行评估，这对于癌症的化疗具有重要的指导意义。

　　3.3? 在免疫学中的应用

　　随着单克隆抗体技术、荧光色素技术的发展，流式细胞仪以其快速、定量测量的特点，被广泛应用于免疫理论研究和临床实践当中。通过与荧光抗原抗体结合，对细胞表面和细胞内部的抗原、癌细胞基因蛋白定量分析，实现细胞分类和亚群分析，这对于各种血液病、癌症、B细胞淋巴瘤的早期诊断和治疗以及对人体细胞免疫功能的评估都具有十分重要的现实意义。通过对患者淋巴细胞各个亚群数量的检测可以了解淋巴细胞的分化功能，同时，通过对疾病的特异性淋巴细胞亚群或者细胞表面标记物的存在、缺失和过度表达等的研究，可以对一些免疫性疾病、 感染性疾病和肿瘤等进行早期诊断和治疗。 此外，还可以利用流式细胞仪进行组织相容性抗原群体分析和器官移植和移植后免疫状态监测。

　　3.4?在血液学中的应用

　　临床中通过对外周血 T 淋巴细胞 、骨髓细胞表面抗原和细胞内DNA 含量的检测，可以对包括白血病、淋巴瘤等多种血液病进行早期诊断、及时治疗和愈后情况的判断。由于各类血细胞都具有特异的抗原，流式细胞仪通过采用特异的抗血细胞表面分化抗原的单克隆抗体，结合荧光染料，就可以测定某个细胞的多项参数，准确地判断细胞属性。流式细胞仪能够在患者恢复期检测体内是否还有残留的病变细胞，这对于及早发现并采取有效措施防止白血病等疾病的复发具有极其重要的现实意义。上述应用只是流式细胞仪广泛应用的一个缩影，流式细胞仪在细胞凋亡检测、器官移植、精子性别控制、临床细菌学、植物学等诸多领域都有十分广泛的应用。可以预见，随着激光、探测器、计算机技术等相关技术的发展，流式细胞仪也将会有更加广泛的应用前景。