把单片机一位赋值给一个变量，能通过判断变量的正负来判断该引脚的高低吗？

这个就要看在引脚电平变化之后，那条赋值语句有没有执行，同时还要考虑赋值之后引脚的电平有没有变化；如果真的需要可以在检查这个变量的前一条语句执行这个赋值（没有中断响应），但这样做还不如直接检查引脚。

直接用P1^0的值来判断就行了，没必要再赋值给一个变量

应该用利用中断吧，最好用程序再判断一下是不是误操作，不知道说的对不

在每次判断之前都必须将P1^0的值重新再付给a,因为a不能代表P1^0。不过你可以这样定义一个宏变量
#define LED_N/F a=P1^0
这样每次用 LED_N/F就可以判断P1^0 状态了